产品货号:
M20081
中文名称:
反转录试剂盒
英文名称:
RT kit for qPCR(gDNA digester plus)
产品规格:
100T|500T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是一款高效、快速的反转录试剂盒,经过反复优化,具有稳定性高、重复性好的特点,同时灵敏度高,与模板的亲和力强,适用于少量模板以及低拷贝基因的反转录反应。反转录产物cDNA可直接用于PCR或Real-Time qPCR,与2×SYBR Green qPCR预混液配合使用即可进行高性能的基因表达分析。
本试剂盒含有2×Super RT Mix和gDNA digester。其中gDNA digester可去除RNA模板中残留的基因组DNA污染,保证后续结果更加可靠。2×Super RT Mix包含反转录反应所需的所有组分(高性能反转录酶、RNase抑制剂、Oligo dT引物、随机引物、RT Buffer、dNTPs),只需加入RNA模板和RNase-free H2O即可快速高效完成反转录反应,并同时有终止gDNA digester的作用,保证cDNA的完整性。
组分 | 100T | 500T |
gDNA digester | 100μL | 100μL×5 |
5×gDNA digester Buffer | 200μL | 200μL×5 |
2×Super RT Mix | 1mL | 1mL×5 |
RNase-Free H2O | 1mL×2 | 1mL×10 |
保存:-20℃
- gDNA digester和2×Super RT Mix含有高浓度的甘油,使用前请短暂离心收集到管底部,并用移液枪轻轻吸打充分混匀后,准确吸取。
- 建议RNA模板溶解于水中。
- 反应液的配制,请在冰上操作完成。
- RNA相关操作等请使用全新RNase-free枪头、RNase-free离心管等实验耗材。建议RNA实验使用的器具、试剂和无菌水等专用,避免RNase污染。
- 高质量、完整的RNA对于获得高质量的cDNA至关重要,为保证反转录成功,请使用高质量的RNA模板。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- gDNA消化处理
在RNase-free PCR管中,按下列组分配制反应液,请在冰上进行。用移液器轻轻吹打混匀。42℃孵育2 mins。成分 用量 5×gDNA digester Buffer 2μL gDNA digester 1μL Total RNA/mRNA 5ng~5μg/5ng~500ng RNase-Free H2O 至10μL - 反转录反应体系
按下表向步骤1的反应管中直接加入2×Super RT Mix,用移液器轻轻吹打混匀。成分 用量 步骤1的反应液 10μL 2×Super RT Mix 10μL - 2×Super RT Mix中含有gDNA digester抑制剂。
- 反转录程序设置
将步骤2配制的反应体系混合均匀后,置于PCR仪中进行反应,具体程序如下:温度 时间 25℃ 5mins 42℃ 30~60mins 85℃ 2mins - 反转录温度:推荐使用42℃。对于高GC含量模板或者结构复杂模板,可将反转录温度提高到50℃。
- 反应结束后,置于冰上冷却。
- 合成的cDNA可立即用于后续PCR或qPCR反应,也可-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。
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